《植物生理学报》 2008, 44(6): 1177-1180

蝴蝶兰原生质体提取方法的优化

乔永旭*, 张永平, 王桂兰, 陈超, 王燕

唐山师范学院生命科学系, 河北唐山063000

通信作者：乔永旭；E-mail: qiaoyx123@163.com；Tel: 0315-3306246

摘　要：

以蝴蝶兰自交品种 NO Ⅱ的无菌苗叶片为试材, 采用单因素试验和正交试验, 比较不同酶的种类、酶液浓度、材料 和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响, 并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明: 在同一种条件下1 g蝴蝶兰叶片加入10 mL酶解液中, 酶解液含1.0%纤维素酶R-10, 1.0%果胶酶, 0.5 mol•L-1甘露醇, 酶解3 h, 有活力的原生质体产量最高, 其产量为 1.3×105 个 •g-1, 活性达81.90%。

关键词：蝴蝶兰; 原生质体; 分离; 提取

收稿：2008-07-23   修定：2008-09-18

资助：河北省科技厅生物工程项目(04547008D-2)。

蝴蝶兰原生质体提取方法的优化

乔永旭*, 张永平, 王桂兰, 陈超, 王燕

唐山师范学院生命科学系, 河北唐山063000

Corresponding author: ; E-mail: qiaoyx123@163.com; Tel: 0315-3306246

Abstract:

以蝴蝶兰自交品种 NO Ⅱ的无菌苗叶片为试材, 采用单因素试验和正交试验, 比较不同酶的种类、酶液浓度、材料 和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响, 并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明: 在同一种条件下1 g蝴蝶兰叶片加入10 mL酶解液中, 酶解液含1.0%纤维素酶R-10, 1.0%果胶酶, 0.5 mol•L-1甘露醇, 酶解3 h, 有活力的原生质体产量最高, 其产量为 1.3×105 个 •g-1, 活性达81.90%。

Key words: 蝴蝶兰; 原生质体; 分离; 提取